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细胞化学技术:
- 酶细胞化学技术:通过酶对特异底物的反应并显色来检测酶在器官、组织和细胞内的分布及酶活性强弱的一种技术。酶细胞化学反应的基本原理是将酶与其底物共同孵育,然后使产物与显色剂反应生成荧光分子、有色可溶性化合物、有色沉淀或高电子密度沉淀,最后通过光度计、光镜、电镜等进行检测和观察。
- 免疫细胞化学技术:利用免疫学中抗原抗体特异性结合的原理来定性和定位研究器官、组织和细胞中的生物活性大分子。
- 放射性自显影技术:用放射性同位素标记生物样品中的大分子或其前体物质,然后通过乳胶感光(卤化银还原成为银原子),显示出被标记物在组织和细胞内的位置、数量及其变化。
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活细胞内分子示踪技术:
- 离子探针:一些染料专一地与某种离子结合后会产生荧光或改变本身荧光的发射波长与强度,从而通过荧光检测可以显示该离子的量。通常称这些染料为离子探针。
- 绿色荧光蛋白(GFP):GFP含有238个氨基酸残基,是一种构象很稳定的蛋白质。它不含辅基,也不需要辅助因子,在蓝色光源(450~490nm)的激发下,发射出绿色荧光(520nm)。GFP基因可以很容易地导入到其他种类的细胞当中去表达。构建绿色荧光蛋白基因与目的蛋白基因的融合基因表达载体,转染特定的细胞,可以在荧光显微镜或者是共聚焦显微镜下观察目的蛋白质在细胞内的位置及随时间变化情况。
- 荧光共振能量转移
- 单分子荧光成像